2×HiF Taq plús Master Mix
Vörunúmer: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (með litarefni) er tilbúin til notkunar 2x forblanduð lausn sem inniheldur Plus HIF DNA pólýmerasa, dNTP og fínstilltan jafnalausn.Tveimur einstofna mótefnum við stofuhita sem hamla pólýmerasavirkni og 3′→5′exónúkleasavirkni er bætt við aðalblönduna fyrir auðveldlega og mjög sértæka Hot Start PCR.Framlengingarstuðlinum er bætt við masterblönduna til að gefa ensíminu langa mögnunargetu, lengd mögnunar getur verið allt að 13 kb, ensímið hefur 5′→3′ DNA pólýmerasavirkni og 3′→5′ exonuclease virkni, tryggð þess er 83 sinnum meiri en Taq DNA pólýmerasa, sem er 9 sinnum meiri en venjulegur DNA pólýmerasa.Það er hentugur fyrir mögnun á flóknum sniðmátum, mögnunarafurðin er barefli.
2×HIF Taq plus Master Mix(With Dye) hefur þá kosti að vera hratt og auðvelt, mikið næmni, sterkur sértækni, góður stöðugleiki o.s.frv., hvarfkerfið þarf aðeins að bæta við grunni og sniðmátum og hægt er að magna það upp með tveggja- skrefasamskiptareglur, sem einfaldar tilraunaskrefin og sparar tíma.Þessi vara inniheldur litarefni fyrir rafdrætti og PCR vörur er hægt að nota beint til rafdráttar.Að auki inniheldur varan einnig sérstakt hlífðarefni, þannig að aðalblandan geti haldið stöðugri virkni eftir endurtekna frystingu.
Geymsluskilyrði
Vörur ættu að geyma við -25 ~ -15 ℃ í 1 ár.
Tæknilýsing
Vörulýsing | Master Mix |
Einbeiting | 2× |
Hot Start | Innbyggð Hot Start |
Yfirhengi | Blunt |
Viðbragðshraði | Hratt |
Stærð (lokavara) | Allt að 13kb |
Skilyrði fyrir flutningi | Þurrís |
Vörugerð | High fidelity PCR forblöndur |
Leiðbeiningar
1.PCR viðbragðskerfi
Íhlutir | Rúmmál (μL) |
DNA sniðmát | Hentar vel |
Forward primer (10 μmól/L) | 2.5 |
Reverse Primer (10 μmól/L) | 2.5 |
2×HIF Taq plús Master Mix | 25 |
ddH2O | til 50 |
2.Mælt er með notkun mismunandi sniðmáta
Tegund sniðmáts | Magnaðu brot frá 1kb til 10 kb |
Erfðafræðilegt DNA | 50ng-200 ng |
Plasmíð eða veiru DNA | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2,5 µL (ekki fara yfir 10% af loka PCR hvarfrúmmáli) |
3.Amplification Protocol
1) Tveggja þrepa siðareglur (flókið sniðmát)
Hjólaskref | Temp. | Tími | Hringrásir |
Upphafleg eðlisbreyting | 98℃ | 3 mín | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
Framlenging | 68℃ | 30 sek/kb | |
Endanleg framlenging | 72℃ | 5 mín | 1 |
2) Þriggja þrepa bókun (venjuleg samskiptaregla)
Hjólaskref | Temp. | Tími | Hringrásir |
Upphafleg eðlisbreyting | 98℃ | 3 mín | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
Hreinsun | 60 ℃ | 20 sek | |
Framlenging | 72℃ | 30 sek/kb | |
Endanleg framlenging | 72℃ | 5 mín | 1 |
3) Hljóðfallsaðferð (flókið sniðmát)
Hjólaskref | Hitastig | Tími | Hringrásir |
Upphafleg eðlisbreyting | 98℃ | 3 mín | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 sek | 15 (1℃ lækkun á hverri lotu) |
Gradient annealing | 70-55 ℃ | 20 sek | |
Framlenging | 72℃ | 30 sek/kb | |
Denaturation | 98℃ | 10 sek |
20 |
Hreinsun | 55 ℃ | 20 sek | |
Framlenging | 72℃ | 30 sek/kb | |
Endanleg framlenging | 72℃ | 5 mín | 1 |
Eiginleikar undir mismunandi mögnunarreglum
Bókunl | Tveggja þrepa | Þriggja þrepa | Gradient annealing |
Sérstakur. | hratt | miðlungs | hægur |
Sérhæfni | hár | miðlungs | hár |
PCR afrakstur | miðlungs | hár | miðlungs |
Uppgötvunarhlutfall | hár | miðlungs | hár |
Skýringar
Vinsamlegast notaðu nauðsynlegar persónuhlífar, slíkar rannsóknarfrakka og hanska, til að tryggja heilsu þína og öryggi!