2×PCR Master Mix (án litarefnis)
PCR Master Mix er eins konar hefðbundin PCR forblönduð lausn sem er tilbúin til notkunar, þar á meðal Taq DNA Polymerase, dNTP blanda MgCl2 og bjartsýni stuðpúða.Á meðan á efnahvarfinu stendur er aðeins hægt að bæta við grunninum og sniðmátinu til mögnunar, sem einfaldar mjög aðgerðaþrep tilraunarinnar.Þessi vara inniheldur framúrskarandi sveiflujöfnun og má geyma í 3 mánuði við 4 ℃.PCR afurðin hefur 3′-dA útskot og er auðvelt að klóna hana inn í T vektor.
Geymsluskilyrði
Varan ætti að geyma við -25 ℃ ~ -15 ℃ í tvö ár.
Tæknilýsing
| Tryggð (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Yfirhengi | 3′-A |
| Pólýmerasi | Taq DNA pólýmerasi |
| Viðbragðssnið | SuperMix eða Master Mix |
| Viðbragðshraði | Standard |
| Vörugerð | PCR Master Mix (2×) |
Leiðbeiningar
1.Viðbragðskerfi
| Íhlutir | Stærð (μL) |
| Sniðmát DNA | Hentar vel |
| Grunnur 1 (10 μmól/L) | 2 |
| Grunnur 2 (10 μmól/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Til 50 |
2.Amplification Protocol
| Hjóla skref | Hitastig (°C) | Tími | Hringrásir |
| Pre-denaturation | 94 ℃ | 5 mín | 1 |
| Denaturation | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Hreinsun | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Framlenging | 72 ℃ | 30-60sek/kb | |
| Lokaframlenging | 72 ℃ | 10 mín | 1 |
Athugasemdir:
1) Sniðmátsnotkun: 50-200 ng erfðafræðilegt DNA;0,1-10 ng plasmíð DNA.
2) Mg2+styrkur: Þessi vara inniheldur 3 mM af MgCl2 sem hentar fyrir flest PCR viðbrögð.
3) Hreinsunarhitastig: Vinsamlega skoðaðu fræðilega Tm gildi grunna.Hægt er að stilla glæðuhitastigið á 2-5 ℃ lægra en fræðilegt gildi grunnsins.
4) Framlengingartími: Fyrir sameindagreiningu er mælt með 30 sek/kb.Fyrir klónun gena, 60sek/kb er mælt með.
Skýringar
1.Til öryggis og heilsu, vinsamlegast notaðu rannsóknarfrakka og einnota hanska til notkunar.
2.Aðeins til rannsóknarnota!
