One Step RT-qPCR SYBR Green Premix
Vörunúmer: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix er til að mæla flúrljómun byggt á SYBR Green I litarefni.Með því að nota genasértæka primera, er öfugumritun og qPCR viðbrögðum lokið í einni túpu, sem útilokar þörfina á endurteknum lokunaropnun og pípettunaraðgerðum, eykur mjög skilvirkni greiningar og dregur úr hættu á mengun.Fyrir RNA sýni notar settið hitaþolinn bakrit fyrir skilvirka myndun cDNA og HotStart Taq DNA pólýmerasa fyrir magnmögnun.Undir bjartsýni stuðpúðakerfinu getur næmni settsins verið allt að 0,1 pg fyrir mjög tjáð markmið og allt að 1 pg fyrir miðlungs tjáð mark.Settið hentar til mögnunar og magngreiningar á DNA sýnum.Það gerir viðkvæma greiningu og magngreiningu kjarnsýra úr mismunandi plöntu- og dýrasýnum, frumum og örverum kleift.
Íhlutir
| No | Nafn | Bindi | Bindi |
| 1 | Háþróaður Buffer | 250 μL | 2×1,25 ml |
| 2 | Háþróuð ensímblöndu | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1,25 ml |
Geymsluskilyrði
Þessa vöru ætti að geyma við -25 ~ -15 ℃ fjarri ljósi í 1 ár.
Leiðbeiningar
1.Viðbragðskerfisstillingard
| Íhlutir | Rúmmál (μL) | Rúmmál (μL) | Endanleg einbeiting |
| Háþróaður Buffer | 12.5 | 25 | 1× |
| Háþróuð ensímblöndu | 1 | 2 | - |
| Forward Primer (10 μmól/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 μmól/L |
| Reverse Primer (10 μmól/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 μmól/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H2Oc | til 25 | til 50 | - |
Athugasemdir:
1) a.Tendanlegur grunnstyrkur var 0,2 μmól/L, sem einnig var hægt að stilla á milli 0,1 og 1μmól/L eftir því sem við á.
2) b.Hvarfefnið er afar næmt, með heildar-RNA á bilinu 1pg-1μg, og prófun á sýnum úr mönnum sýndi ákjósanlegasta inntakið 1 pg-100 ng, sem stjórnaði fyrir heildar Ct gildi á bilinu 15-30 eftir því sem við á.
3) c.Mælt er með því að nota 20μL eða 50μL til að tryggja réttmæti og endurgerðanleika markgenamögnunar.
4) d.Vinsamlega undirbúið þig á ofurhreina bekknum og notaðu núkleasaleifarlausar odd og hvarfrör;Mælt er með ábendingum með síuhylkjum.Forðist krossmengun og úðamengun.
2.Viðbragðsáætlun
| Hjólaskref | Temp. | Tími | Hringrásir |
| Öfug umritun | 50 ℃a | 6 mín | 1 |
| Upphafleg eðlisbreyting | 95 ℃ | 5 mín | 1 |
| Mögnunarviðbrögð | 95 ℃ | 15 sek | 40 |
| 60 ℃b | 30 sek | ||
| Bræðsluferill stig | Sjálfgefið tæki | 1 | |
Athugasemdir:
1) a.Hægt er að velja öfuga umritunarhitastig á bilinu 50-55°C í samræmi við tilraunaþarfir.Fyrir DNA sýni er hægt að sleppa öfugu umritunarferlinu.
2) b.Í sérstökum tilfellum er hægt að stilla útglöðu/lengingarhitastigið í samræmi við Tm gildi grunnsins, mælt er með 60°C.
Skýringar
1. Þessi vara er eingöngu til rannsóknarnotkunar.
2. Vinsamlega notaðu rannsóknarfrakka og einnota hanska til öryggis.
