Ultra Nuclease GMP-gráðu
Vörunúmer: HC2016A
UltraNuclease GMP-gráðu er tjáð og hreinsuð í Escherichia coli (E.coli) með erfðatækni og framleidd undir GMP umhverfi.Það getur dregið úr seigju frumufljótandi og frumulýsis í vísindarannsóknum, aukið skilvirkni próteinhreinsunar og aukið próteinvirknirannsóknir.Varan getur einnig minnkað kjarnsýruleifar hýsils niður í pg-gráðu, aukið afköst og öryggi líffræðilegra vara í notkun, þar á meðal veiruhreinsun, bóluefnaframleiðslu og prótein/fjölsykru lyfjaframleiðslu.Að auki er einnig hægt að nota vöruna til að koma í veg fyrir að einkjarna frumur úr útlægum blóði manna (PBMC) kekkjast í frumumeðferð og þróun bóluefna.
UltraNuclease er útvegaður í formi dauðhreinsaðs hvarfefnis, skolað í jafnalausn (20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glýserín), með útliti litlauss, gagnsæs vökva.Þessi vara er framleidd samkvæmt GMP ferli kröfum og veitt í fljótandi formi.
Íhlutir
UltraNuclease GMP-gráðu (250 U/μL)
Geymsluskilyrði
Varan er send með þurrís og má geyma við -25℃~-15°C í tvö ár.
Ef varan er opnuð og hefur verið geymd við 4 ℃ í meira en viku mælum við með síunvöruna til að koma í veg fyrir örverumengun.
Tæknilýsing
| Tjáningargestgjafi | Raðbrigða E. coli með UltraNuclease geni |
| Mólþyngd | 26,5 kDa |
| rafmagnspunktur | 6,85 |
| Hreinleiki | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Geymslubuff | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% glýserín |
|
Eining Skilgreining | Skilgreiningin á einni virknieiningu (U) er magn ensíms sem notað er viðbreyttu frásogsgildi ΔA260 um 1,0 á 30 mínútum í 2,625 mlhvarfkerfi við 37 ℃ með pH 8,0 (jafngildir fullkominni meltingu á37 μg laxasæði DNA í fákirni). |
Leiðbeiningar
1. Sýnishorn Safn
Viðloðandi frumur: fjarlægðu miðilinn, þvoðu frumurnar með PBS og fjarlægðu flotið.
Sviffrumur: safnaðu frumunum með skilvindu, þvoðu frumurnar með PBS, skilvindu við 6.000snúninga á mínútu í 10 mín, safnaðu kögglinum.
Escherichia coli: safnaðu bakteríunum með skilvindu, þvoðu einu sinni með PBS, skildu við 8.000snúninga á mínútu í 5 mín og safnaðu kögglinum.
2. Sýnameðferð
Meðhöndlaðu söfnuðu frumukögglana með leysistuðpúða í hlutfallinu massa(g) og rúmmáls(ml)1:(10-20), eða með vélrænum eða efnafræðilegum aðferðum á ís eða við stofuhita (1g af frumukúlu inniheldur u.þ.b.
109 frumur).
3. Ensímmeðferð
Bætið 1-5mM MgCl við hvarfkerfið og stillið pH í 8-9.
Bætið UltraNuclease í samræmi við hlutfallið 250 einingar til að melta 1 g af frumuköglum, ræktið við 37 ℃ í meira en 30 mínútur.Vinsamlegast skoðaðu eyðublaðið „Mæltur viðbragðstími“ til að veljalengd meðferðar.
4. Flotvatn Safn
Miðfleytt við 12.000 snúninga á mínútu í 30 mínútur og safnað flotinu.
Athugið: Ef lausnin er súr eða basísk, eða inniheldur háan styrk af salti, þvottaefnum eðanáttúrulyf, vinsamlegast aukið ensímskammtinn eða lengið meðferðartímann í samræmi við það.
Mælt viðbragðsskilyrðions
| Parameter | Ákjósanlegt ástand | Árangursríkt ástand |
| Mg²+styrkur | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Hitastig | 37℃ | 0-42 ℃ |
| DTT styrkur | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptóetanól styrkur | 0-100 mM | >0 mM |
| Eingildar katjónastyrkur | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon Styrkur | 0-10 mM | 0-100 mM |
Mælt er með Viðbrögð Tími (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease Magn (lokastyrkur) | Viðbragðstími |
| 0,25 U/ml | >10 klst |
| 2,5 einingar/ml | >4 klst |
| 25 U/mL | 30 mín |
Athugasemdir:
Vinsamlegast notaðu nauðsynlegar persónuhlífar, svo sem rannsóknarfrakka og hanska, til að tryggja heilsu þína og öryggi!
