Fosfatasa basískt (ALP)
Lýsing
Alkalískur fosfatasi er unninn úr raðbrigða E. coli stofni sem ber TAB5 genið.Ensímið hvatar affosfórun 5´ og 3´ enda DNA og RNA fosfómónestera.Einnig vatnsrýrir það ríbósa, sem og deoxýríbónúkleósíð þrífosföt (NTP og dNTP).TAB5 Alkaline Phosphatase virkar á 5' útstæða, 5' innfellda og barefli.Fosfatasa er hægt að nota í mörgum sameindalíffræðilegum forritum, svo sem klónun eða prófunarendamerkingu til að fjarlægja fosfórýleruðu endana á DNA eða RNA.Í klónunartilraunum kemur affosfórun í veg fyrir að línugerð plasmíð DNA sé sjálfbinding.Það getur einnig brotið niður óinnbyggða dNTP í PCR viðbrögðum til að útbúa sniðmát fyrir DNA raðgreiningu.Ensímið er algjörlega og óafturkræft óvirkt með því að hita það við 70°C í 5 mínútur og þar með er óþarfi að fjarlægja fosfatasann fyrir bindingu eða lokamerkingu
Notkun
1.Alkalískur fosfatasi tengdur við prótein (mótefni, streptavidin osfrv.) getur sérstaklega greint marksameindir og hægt að nota í ELISA, WB og vefjaefnafræðilegri greiningu;
2. Hægt er að nota basískan fosfatasa til að affosfóra 5'-enda DNA eða RNA til að koma í veg fyrir sjálftengingu;
3. Ofangreint affosfórýlerað DNA eða RNA er hægt að merkja með geislamerktum fosfötum (með T4 fjölkjarnakínasa)
Efnafræðileg uppbygging
Forskrift
| Prófunaratriði | Tæknilýsing |
| Ensímvirkni | 5U/μL |
| Innkirtlavirkni | Ekki greint |
| Exonuuclease virkni | Ekki greint |
| Nicking Activity | Ekki greint |
| RNase virkni | Ekki greint |
| E.coli DNA | ≤1 eintak/5U |
| Endotoxín | LAL-próf, ≤10EU/mg |
| Hreinleiki | ≥95% |
Flutningur og geymsla
Samgöngur:AmbIent
Geymsla:Geymið við 2-8°C
Mælt er með endurprófunLíf:2 ár
