Veiru DNA/RNA útdráttarsett
Þetta sett er hentugur fyrir hraðan útdrátt á mjög hreinu veiru DNA/RNA úr sýnum eins og nefkoksþurrku, umhverfisþurrku, frumuræktunarfrumvökva og vefjajafnhæft yfirborð.Settið er byggt á kísilhimnuhreinsunartækni sem útilokar þörfina á að nota fenól/klóróform lífræna leysi eða tímafreka áfengisútfellingu til að draga út veiru DNA/RNA af háum gæðum.Kjarnsýrurnar sem fást eru lausar við óhreinindi og tilbúnar til notkunar í niðurstreymistilraunum eins og öfugumritun, PCR, RT-PCR, rauntíma PCR, næstu kynslóðar raðgreiningu (NGS) og Northern blot.
Geymsluskilyrði
Geymið við 15 ~ 25 ℃ og flytjið við stofuhita
Íhlutir
| Íhlutir | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| RNase-frítt ddH2 O | 6 ml |
| FastPure RNA dálkar | 100 |
| Söfnunarrör (2ml) | 100 |
| RNase-laus söfnunarrör (1,5 ml) | 100 |
Buffer VL:Gefðu umhverfi fyrir lýsu og bindingu.
Buffer RW:Fjarlægðu leifar af próteinum og öðrum óhreinindum.
RNase-frítt ddH2O:Skolaðu DNA/RNA úr himnunni í snúningssúlunni.
FastPure RNA dálkar:Sérstaklega aðsogast DNA/RNA.
Söfnunarrör 2 ml:Safnaðu síuvökva.
RNase-laus söfnunarrör 1,5 ml:Safnaðu DNA/RNA.
Umsóknir
Nasofkoksþurrkur, umhverfisþurrkur, frumuræktunarfrumvökvi og vefjajafnhæft flot.
Sjálf útbúin Materíals
RNase-lausir pípettuoddar, 1,5 ml RNase-laus skilvinduglös, skilvindu, hvirfilhrærivél og pípettur.
Tilraunaferli
Framkvæmdu öll eftirfarandi skref í líföryggisskáp.
1. Bætið 200 μl af sýninu í RNase-frítt skilvinduglas (fyllið upp með PBS eða 0,9% NaCl ef ekki er nægjanlegt sýni), bætið við 500 μl af Buffer VL, blandið vel saman með því að hvirfla í 15 – 30 sek. stutta stund til að safna blöndunni neðst á rörinu.
2. Settu FastPure RNA dálka í söfnunarrör 2 ml.Flyttu blönduna úr skrefi 1 yfir í FastPure RNA dálka, skildu við 12.000 rpm (13.400 × g) í 1 mín og fargaðu síuvökvanum.
3. Bætið 600 μl af Buffer RW við FastPure RNA súlurnar, skilið í skilvindu við 12.000 rpm (13.400 × g) í 30 sekúndur og fargið síuvökvanum.
4. Endurtaktu skref 3.
5. Miðfleyttu tómu súlunni við 12.000 snúninga á mínútu (13.400 × g) í 2 mín.
6. Flyttu FastPure RNA dálka varlega í ný RNase-frí söfnunarglös 1,5 ml (meðfylgjandi í settinu) og bættu 30 – 50 μl af RNase-fríu ddH2O við miðju himnunnar án þess að snerta súluna.Látið standa við stofuhita í 1 mín. og skilið í skilvindu við 12.000 rpm (13.400 × g) í 1 mín.
7. Fleygðu FastPure RNA dálkum.Hægt er að nota DNA/RNA beint fyrir síðari mælingar, eða geymt við -30~ -15°C í stuttan tíma eða -85 ~-65°C í lengri tíma.
Skýringar
Aðeins til rannsóknarnota.Ekki til notkunar í greiningaraðferðum.
1. Komdu sýnum í jafnvægi að stofuhita fyrirfram.
2. Veirur eru mjög smitandi.Vinsamlegast tryggðu að allar nauðsynlegar öryggisráðstafanir séu gerðar fyrir tilraunina.
3. Forðist endurtekna frystingu og þíðingu á sýninu, þar sem það getur leitt til niðurbrots eða minni uppskeru af útdregnu veiru DNA/RNA.
4. Sjálfgerður búnaður inniheldur RNase-fría pípettuodda, 1,5 ml RNase-frjáls skilvindurör, skilvindu, hvirfilhrærivél og pípettur.
5. Þegar settið er notað skaltu vera með rannsóknarfrakka, einnota latexhanska og einnota grímu og nota RNase-fríar rekstrarvörur til að lágmarka hættuna á RNase-mengun.
6. Framkvæmdu öll skref við stofuhita nema annað sé tekið fram.
Vélbúnaður og vinnuflæði
