RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Þessi vara inniheldur hvarfstuðpúða, RT-ensímblöndu (Bst DNA pólýmerasa og hitaþolinn bakrit), frostþurrkað verndarefni og litningavaldandi litarefnishluta.Til að nota, notaðu bara Buffer, hvarfensím og grunnur er blandað saman og bætt við sniðmátið;að bæta við frostþurrkuðu verndarefni getur verið beint.Það var tengt við frostþurrkara og frostþurrkað og aðeins primerunum og sniðmátunum var bætt við þegar það var notað.Þetta sett veitir skjóta, skýra sjónræna greiningu á mögnun, þar sem neikvæð viðbrögð eru sýnd með rauðu og jákvæð viðbrögð eru gefin til kynna með breytingu í gult.
Hluti
| Hluti | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Lykkjumiðlaður mögnunarbuffi (með litarefni) | 0,96 ml | 4,80 mL×2 | 9,60 mL×10 |
| RT-Ensím blanda | 270 μL | 2,70 ml | 2,70 mL×10 |
| Frostþurrkað verndarefni | 0,96 mL×2 | 9,60 mL×2 | 9,60 mL×20 |
Umsóknir
Fyrir DNA eða RNA jafnhita mögnun.
Geymsluskilyrði
Flutt með þurrís, geymt við -25~ -15 ℃.Forðist tíða frostþíðingu, varan gildir í 12 mánuði.
Bókun
1.Þiðið hvarflausnina sem á að nota við stofuhita.Hringdu í stutta stund eða hvolfdu túpum nokkrum sinnum til að blandast vandlega, skildu síðan til að safna vökvanum í botn túpunnar.
2.Undirbúningur viðbragðskerfis.Þetta hvarfefni er hægt að útbúa í tveimur hvarfkerfum, fljótandi hvarfblöndu og frostþurrkuðu kerfisblöndu.
1) Útbúið fljótandi hvarfblöndu
| Hluti | Bindi |
| Lykkjumiðlaður mögnunarbuffi (með litarefni) | 10 μL |
| RT-Ensím blanda | 2,8 μL |
| 10 × grunnblandaa | 5 μL |
| Sniðmát DNA/RNA b | × μL |
| Kjarnalaust vatn | Allt að 50 μL |
2) Blanda af frostþurrkunarkerfi
① Undirbúðu frostþurrkaða blöndu
| Hluti | Bindi |
| Lykkjumiðlaður mögnunarbuffi (með litarefni) | 10 μL |
| Frostþurrkað verndarefni | 20 μL |
| RT-Ensím blanda | 2,8 μL |
| Kjarnalaust vatn | Allt að 50 μL |
② Frostþurrkun: Tilbúin blanda var frostþurrkuð í 50μL kerfi
③ Undirbúið hvarfblöndu
| Hluti | Bindi |
| Frostþurrkuð blanda | 1 stykki |
| 10 × grunnblandaa | 5 μL |
| Sniðmát DNA/RNA b | × μL |
| Kjarnalaust vatn | Allt að 50 μL |
Athugasemdir:
1) a.10×Primer Mix : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) b.Mælt er með DEPC (vatnsleysanlegt) fyrir kjarnsýrutempl.
1.Ræktað við 65°C í 30-45 mínútur, sem hægt er að lengja á viðeigandi hátt í samræmi við litabreytingar.
2.Samkvæmt berum augum var gult jákvætt og rautt neikvætt.
Skýringar
1.Salt getur birst í botni biðpúðaglassins, hringið í stutta stund eða snúið rörunum við nokkrum sinnum til að blandast vandlega við stofuhita.
2.Hægt er að fínstilla hvarfhitastigið á milli 62 ℃ og 68 ℃ í samræmi við ástand grunna.
3.Pökkuðu hvarfefnin ættu ekki að vera í snertingu við loft í langan tíma.
4.Rauða og gula aflitunarviðbrögðin eru háð pH-breytingu hvarfkerfisins, vinsamlegast ekki nota Tris kjarnsýru geymslulausnina, mælt með því að nota ddH2O geymd kjarnsýra;
5.Tilraunin ætti að vera stöðluð, þar á meðal undirbúningur hvarfkerfisins, frostþurrkun og sýnisvinnsla og sýnisbætt ferli;
6.Til að forðast mengun er mælt með því að undirbúa viðbragðskerfið á ofurhreinum bekk, í öðrum.
