Peroxidasi (Piparrót uppspretta) Samheiti: Vetnisperoxíð oxidoreductasi;HRP
Lýsing
Piparrótarperoxidasi (HRP) er einangrað úr rótum piparrótar (Amoracia rusticana) og tilheyrir ferróprótóporfýrín hópi peroxidasa.HRP sameinast auðveldlega vetnisperoxíði (H2O2).[HRP-H2O2] flókið sem myndast getur oxað margs konar vetnisgjafa:
Gefi + H2O2 → Oxað gjafa + 2 H2O
HRP mun oxa ýmis hvarfefni (sjá töflu 1):
• Litningavaldandi
• Efnalýsandi (eins og luminol eða isoluminol)
• Flúorógen (eins og týramín, hómóvanillínsýra eða 4-hýdroxýfenýlediksýra)
HRP er einkeðju fjölpeptíð sem inniheldur fjórar tvísúlfíðbrýr.HRP er glýkóprótein sem inniheldur 18% kolvetni.Kolvetnasamsetningin samanstendur af galaktósa, arabínósa, xýlósa, fúkósi, mannósa, mannósamíni og galaktósamíni, allt eftir tilteknu ísósími.
HRP er mikið notað merki fyrir immúnóglóbúlín í mörgum mismunandi ónæmisefnafræði forritum, þar á meðal ónæmisblettingu, ónæmisvefjafræði og ELISA.HRP er hægt að tengja við mótefni með nokkrum mismunandi aðferðum, þar á meðal glútaraldehýði, perjodat oxun, í gegnum tvísúlfíðtengi og einnig með amínó- og þíólstýrðum krosstengjum.HRP er eftirsóttasta merkið fyrir mótefni, þar sem það er minnsta og stöðugasta af þremur vinsælustu ensímmerkjunum (peroxidasi, β-galaktósíðasi, basískur fosfatasi) og glýkósýlering þess leiðir til minni ósértækrar bindingar.Úttekt á glútaraldehýð og peródat samtengingaraðferðum hefur verið birt.
Peroxíðasi er einnig notaður til að ákvarða glúkósa4 og peroxíð í lausn.Nokkur rit, 6-24 ritgerðir, 25-29 og ritgerðir 30-46 hafa vitnað í notkun P8375 í rannsóknarsamskiptareglum sínum.
Efnafræðileg uppbygging
Forskrift
Prófunaratriði | Tæknilýsing |
Lýsing | Rauðbrúnt formlaust duft, frostþurrkað |
Virkni | ≥100U/mg |
Hreinleiki (SDS-PAGE) | ≥90% |
Leysni (10mg duft/ml) | Hreinsa |
Ensím sem mengar | |
NADH/NADPH oxidasi | ≤0,1% |
Catalase | ≤0,005% |
ATPasi | ≤0,03% |
Flutningur og geymsla
Samgöngur:Sendist undir 2-8°C
Geymsla:Geymið við -20°C (langtíma), 2-8°C (skammtíma)
Mælt er með endurprófunLíf:2 ár