DNasi I

DNasi I (Deoxyribonuclease I) er endodeoxyribonuclease sem getur melt ein- eða tvíþátta DNA.Það þekkir og klýfur fosfódíestertengi til að framleiða mónódeoxýkjarni eða ein- eða tvíþátta fákýni með fosfathópum á 5'-endanum og hýdroxýl í 3'-endanum.Virkni DNase I fer eftir Ca2+ og hægt er að virkja hana með tvígildum málmjónum eins og Mn2+ og Zn2+.5mM Ca2+ verndar ensímið fyrir vatnsrofi.Í nærveru Mg2+ gæti ensímið af handahófi þekkt og klofið hvaða stað sem er á hvaða DNA streng sem er.Í nærveru Mn2+ er hægt að þekkja tvíþræði DNA samtímis og klofna á næstum sama stað til að mynda flata enda DNA búta eða klístraða DNA búta með 1-2 núkleótíðum sem standa út.

Vörueign

DNasi I frá nautgripaskirtli var tjáður í gertjáningarkerfi og hreinsað.

Cstjórnarliðar

Flutningur og geymsla

1. Geymslustöðugleiki: - 15 ℃ ~ -25 ℃ fyrir geymslu;

2.Transport Stöðugleiki: Flutningur undir íspökkum;

3. Fæst í: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl₂, 50% glýseról, pH 7,6 við 25 ℃.

Eining Skilgreining

Ein eining er skilgreind sem magn ensíms sem brotnar niður 1 µg af pBR322 DNA á 10 mínútum við 37°C.

Gæðaeftirlit

RNase:5U af DNase I með 1,6 μg MS2 RNA í 4 klukkustundir við 37 ℃ gefur ekkert niðurbrot eins og ákvarðað er með rafdrætti á agarósageli.

Baktería Endotoxín:LAL-próf, samkvæmt kínverskri lyfjaskrá IV 2020 útgáfu, hlaupmörkprófunaraðferð, almenn regla (1143).Innihald endotoxíns úr bakteríum ætti að vera ≤10 ESB/mg.

Leiðbeiningar um notkun

1. Undirbúið hvarflausnina í RNase-lausu rörinu í samræmi við hlutföllin sem talin eru upp hér að neðan:

2,37 ℃ í 15 mínútur;

3. Bætið við stöðvunarjafna til að stöðva hvarfið og hitið við 65 ℃ í 10 mínútur til að óvirkja DNase I. Sýnið er hægt að nota beint í næstu umritunartilraun.

Skýringar

1.Notaðu 1U DNase I á hvert μg af RNA, eða 1U DNase I fyrir minna en 1μg af RNA.

2.EDTA ætti að bæta við í lokastyrk 5 mM til að vernda RNA frá niðurbroti við óvirkjun ensíma.