Bst 2.0 DNA pólýmerasi (glýseróllaus, hárþéttleiki)
Bst DNA pólýmerasi V2 er unninn úr Bacillus stearothermophilus DNA pólýmerasi I, sem hefur 5′→3′ DNA pólýmerasavirkni og sterka keðjuuppbótarvirkni, en enga 5′→3′ exonucleasa virkni.Bst DNA pólýmerasi V2 hentar ákjósanlega fyrir strengjafærslu, jafnhitafjölgun LAMP (Loop mediated isothermal amplification) og hraða raðgreiningu.Þessi Bst DNA pólýmerasi V2 er fær um að hindra virkni DNA pólýmerasa við stofuhita, þannig að hægt sé að nota hann og hægt sé að móta hvarfkerfið við stofuhita, koma í veg fyrir ósértæka mögnun og bæta skilvirkni hvarfsins, og þessi útgáfa getur vera frostþurrkaður.Að auki er það fær um að losa virkni sína við hærra hitastig og útiloka þannig þörfina fyrir sérstakt virkjunarþrep.
Íhlutir
| Hluti | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA pólýmerasi V2 (glýseróllaus) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Umsóknir
1.LAMP jafnvarma mögnun
2.DNA strengur einfærsluviðbrögð
3.Há GC gena raðgreining
4.DNA raðgreining á nanógrömmum.
Geymsluástand
Flutningur undir 0°C og geymdur við -25°C~-15°C.
Eining Skilgreining
Ein eining er skilgreind sem magn ensíms sem fellur 25 nmól af dNTP í sýruóleysanlegt efni á 30 mínútum við 65°C.
LAMPE Viðbrögð
| Íhlutir | 25 μLKerfi |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 2,5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 μL |
| dNTP (10mM hver) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Grænn (25×)a | 1,0 μL |
| Primer blandab | 6 μL |
| Bst DNA pólýmerasi V2 (glýseróllaust) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Sniðmát | × μL |
| ddH₂O | Allt að 25 μL |
Athugasemdir:
1) a.SYTOTM 16 Grænn (25×): Samkvæmt tilraunaþörfum er hægt að nota önnur litarefni sem staðgöngu;
2) b.Grunnblanda: fengin með því að blanda 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB og önnur rúmmál.
Viðbrögð og ástand
1 × HC Bst V2 Buffer, ræktunarhitastigið er á milli 60°C og 65°C.
Hita óvirkjun
80°C, 20 mín.
